...are de carne, lapte si oua. De asemenea au mai fost folositi si pentru previnerea anumitor boli, dar si pentru accelerarea cresterii.Legislatia Uniunii Europene privind utilizarea antibioticelorPentru protejarea sanatatii consumatorilor Uniunea Europeana a stabilit limite maxime pentru rezidurile de produse medicamentoase in tesuturile animaliere provenite. Aceste limite au se incadreaza intre factori de 10-100 pentru a asigura o hrana lipsita de reziduri nocive.Anumite antibiotice au fost interzise pentru animalele producatoare de carne, lapte si oua.Strategii analitice pentru determinarea rezidurilor de antibioticeLa ora actuala exista putine metode capabile sa masoare concentratiile de antibiotice la limitele impuse de UE pentru ca unele antibiotice nu sunt solubile in solventi organici, ceea ce a ingreunat extragerea rezidurilor ti stabilitrea concentatiilor lor din tesuturi. Alte antibiotice nu sunt suficient de volatile sau sunt prea instabile la temperaturi inalte pentru a permite analiza lor folosinr GC sau GC-MS. Astfel multe din metodele de masurare a rezidurilor de antibiotice se bazeaza pe HPLC. Cu toate acestea HPLC nu este o metode suficient de specifica pentrua fi utilizata ca referinta in UE.PenicilinePenicilinele fig 10-acidul 6-aminoampicilinic sunt administrat animalelor producatoare de carne, lapte si oua din motive terapeutice dar si prolifice. Manipularea catenei laterale fost a modificat spectrul antibacterian al penicilinei pentru a include atat bacteriile gram-pozitive, cat si cele gram-negative.O gama larga de procedee LC-MS a fost aplicata pentru analiza penicilinei in tesuturi, dar si in lapte. S-au inregistrat metode care folosesc atat ioni pozitivi, cat si ioni negativi. Comparatia acestor metode in ceea ce priveste sensibilitatea este dependenta de instrumentele folosite, dar si de tehnicile de ionizare.Un numar mare de cercetatori au folosit metoda cu ioni pozitivi. Mecanismul de fragmentare presupune deschiderea inelului a-lactam, urmata de hidratarea si pierderea dioxidului de carbon.In 1989 Tyczkoska et al. a aplicat LC-MS la penicilina G in laptele de bovina. Laptele a fost diluat cu un volum echivalent de acetonitril-metanol-apa 402020, vvv pentru ca proteina sa precipite. Dupa aceea a fost centrifugat. Pentru masurare s-a folosit un spectrometru de masa Finnigan Mat 4800. Sistemul LC consista dintr-un cartus Bronlee Phenyl Spheri-5 cu faza mobila de izopropanol 0.2M, acetat de amoniu si acid acetic 12.585.52, vvv. LOD-ul a fost 100 agl bazat pe monitorarea ionului iMHs la mz 335 si iMHH2O-CO2sla mz 309.Voyksner et al. a dezvoltat aceasta metoda aplicand-o si pentru cloxacilina, ampicilina si amoxacilina in laptele de bovina. Pentru a optimiza sensibilitatea metodei pentru amoxicilina s-au monitorizat ionii iMHs la mz 366 si iFHs la mz 207 datorita abundantei de ioni iMHH2OCO2s la 340. LOD-urile au fost estimate la 100, 200, 200 agl. in timp ce alti cercetatori au folosit LC-MS pentru confirmare, linearitatea a fost obtinuta cu coeficientii de corelatie de 0.9996. Comparatia facuta intre nivelele de cloxacilina din lapte determinate cu LC-UV si LC-MS a demonstrat apropierea rezultatelor.LC-MS a fost folosita impreuna cu detectarea UV de Boison et Al. pentru a confirma prezenta penicilinei in lapte. Dupa precipitarea proteinei probele au fost aplicate unui cartus Bond Elut C18 SPE din care penicilinele au fost eluate cu aceto-nitril 0.0125 M si acetat de amoniu 6040, vv. Separarea LC a fost obtinuta folosind o coloana Nova-Pak C18 cu faza mobila de acetonitril 0.15 M si acetat de amoniu 1090, vv. s-a folosit un spectrometru de masa VG Trio II. Cercetatorii au declarat ca raspunsul penicilinei G mz 352 cu concentratie de 5 agkg a fost slab.Voyksner si Pack au studiat fragmentarea folosind tehnici electrospray si ionspray cu Cid pentru a reproduce informatia structurala a penicilinei G si cloxacilinei. Fragmente din ionii de iMHH2O-CO2s nu au fost detectate la electrospray. Cum s-a crescut potentialul, s-au format fragmente de ioni provenite de la inelul a-lactam. La diferemte mai mari depotental s-au format ioni avand valori de mz sub 100.Studii echivalente asupra spectrului de ioni negativi folosind Analytica electrospray MS Model 100547-3 conectat la un spectometru de masa Halett Packard 5989A. In general metoda cu ioni negativi a produs semnale cu intensitati mai mici comparativ cu metoda ioni ...
Download